1. Dingo: È noto che i dingo, introdotti in Australia dagli esseri umani, predano i marsupiali carnivori più piccoli. Si ritiene che abbiano ampliato il loro areale fino alla Tasmania e probabilmente abbiano gareggiato con i tilacini per il cibo e il territorio.
2. Umani: Gli esseri umani erano i predatori più significativi dei tilacini. A causa della loro percepita minaccia per il bestiame, in particolare per le pecore, i tilacini furono attivamente cacciati e uccisi da coloni e agricoltori nel XIX e XX secolo. Furono offerte taglie per la loro cattura o distruzione, portando a un significativo calo della loro popolazione.
3. Malattie europee: L'arrivo dei coloni europei portò con sé varie malattie che colpirono la popolazione dei tilacini. Il cimurro, in particolare, era altamente contagioso e mortale per molti animali nativi australiani, compresi i tilacini.
4. Distruzione dell'habitat: L'espansione degli insediamenti umani, il disboscamento per l'agricoltura e il disboscamento hanno contribuito alla perdita e alla frammentazione degli habitat naturali dei tilacini. Ciò limitava la loro capacità di trovare cibo, riprodursi ed evitare i predatori.
Sebbene ci siano resoconti di tilacini che occasionalmente evitavano i predatori cercando rifugio in caverne o fitta vegetazione, l'impatto complessivo di questi predatori e la persecuzione umana portò alla finale estinzione della specie.