* Nicodemus: Il saggio e anziano leader dei topi.
* Jonathan: Il figlio di Nicodemus, un giovane e ambizioso topo che spesso mette in discussione la leadership di suo padre.
* Mrs. Brisby: Il personaggio principale della storia, un topo di campo vedovo che cerca aiuto dai topi per spostare la sua casa.
* Jeremy: Il figlio della signora Brisby, che è gravemente malato.
* Justin: L'altro figlio della signora Brisby.
* Timoteo: Il nipote di Nicodemus, che è piuttosto timido e spesso si mette nei guai.
Nota: Mentre "Mrs. Frisby and the Rats of Nimh" è un classico libro per bambini, non si fa menzione di ratti chiamati "NIMH" nel libro. "NIMH" si riferisce al National Institute of Mental Health, dove erano stati sperimentati i topi nella storia.